雙十一專場(chǎng)應(yīng)勢(shì)而來！

雙十一的號(hào)角已經(jīng)吹響，

您的購(gòu)物清單更新了嗎？

在您為生活添置好物的同時(shí)，別忘了那個(gè)在實(shí)驗(yàn)室里奮斗的自己——您最得力的“科研伙伴”，也值得一次全面的效能升級(jí)！

我們以匠心儀器回饋您的專業(yè)選擇，更以真摯好禮感謝您的每一份支持。

參與文末簡(jiǎn)單粗暴的評(píng)論點(diǎn)贊活動(dòng)，價(jià)值數(shù)千元的壕禮等您免費(fèi)來拿！

工欲善其事，必先利其器。

柏恒科技深耕生物學(xué)設(shè)備領(lǐng)域，以匠心打造可靠、精準(zhǔn)、高效的實(shí)驗(yàn)設(shè)備，為您的科研數(shù)據(jù)保駕護(hù)航。

「實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀」

Real-Time PCR

以高靈敏度、高精準(zhǔn)度品質(zhì)，配備卓越的線性范圍與穩(wěn)定的重復(fù)性，助您在CT的探索、基因表達(dá)分析、SNP分型、病原體檢測(cè)等領(lǐng)域獲得可靠數(shù)據(jù)，讓每一次擴(kuò)增都清晰可見。

「智能梯度PCR儀」

Thermal Cycler

精準(zhǔn)的溫控系統(tǒng)和高效的升降溫速率，搭配智能梯度功能，助您快速優(yōu)化最佳的溫度，大幅提升實(shí)驗(yàn)效率，是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的得力助手。

「超微量分光光度計(jì)」

BGNANO-600

僅需微量樣本，即可快速、準(zhǔn)確地完成核酸和蛋白的濃度及純度檢測(cè)。完美適配珍貴樣本，有效節(jié)約實(shí)驗(yàn)成本。

「酶聯(lián)免疫分析儀」

BGMR-1000

強(qiáng)大的功能與靈活的檢測(cè)模式，適用于ELISA、細(xì)胞活力、蛋白定量等多種應(yīng)用。自動(dòng)化操作，輕松應(yīng)對(duì)高通量篩選，解放您的雙手。

「核酸提取儀」

BGNA-32P

高效、穩(wěn)定、防污染，提供高質(zhì)量的核酸提取解決方案。標(biāo)準(zhǔn)化流程保證結(jié)果的一致性，讓您從繁瑣的重復(fù)操作中解脫，專注于更重要的數(shù)據(jù)分析。

雙十一重磅福利：

留言點(diǎn)贊，贏取階梯壕禮

我們深知，每一次點(diǎn)贊的背后，都是您對(duì)我們的關(guān)注與認(rèn)可。

為此，我們?cè)O(shè)立了階梯式大獎(jiǎng)，回饋您的每一次熱心參與！無需復(fù)雜拼單，動(dòng)動(dòng)手指，獎(jiǎng)品可能就屬于您！

01活動(dòng)時(shí)間 ?

即日起至2025年11月13日 17:00

02參與方式 ?

1. 點(diǎn)擊關(guān)注 “柏恒科技” 微信公眾號(hào)；
2. 在本篇文章下方留言區(qū)，寫下您想對(duì)我們說的話（例如：對(duì)產(chǎn)品的期待、使用感受或任何祝福）；
3. 邀請(qǐng)好友為您的精彩留言點(diǎn)贊！

03獲獎(jiǎng)規(guī)則與階梯禮品 ?

活動(dòng)結(jié)束后，我們將根據(jù)最終點(diǎn)贊數(shù)排名，為以下符合條件的用戶郵寄獎(jiǎng)品（包郵到家?。?/p>

榮耀金獎(jiǎng)（1名）：品牌（原始人）露營(yíng)帳篷（價(jià)值999元）

獲獎(jiǎng)對(duì)象：點(diǎn)贊數(shù)排名第1名的用戶

人氣銀獎(jiǎng)（2名）：折疊烤涮爐（價(jià)值398元）

獲獎(jiǎng)對(duì)象：點(diǎn)贊數(shù)排名第2、第3名的用戶

實(shí)力銅獎(jiǎng)（3名）：空氣炸電烤箱（價(jià)值358元）

獲獎(jiǎng)對(duì)象：點(diǎn)贊數(shù)排名第4至第6名的用戶

陽光普照獎(jiǎng)（10名）：京東100元電子卡

獲獎(jiǎng)對(duì)象：點(diǎn)贊數(shù)排名第7至第16名的用戶。

溫馨提示

1. 歡迎所有人參與本次活動(dòng)，只需關(guān)注本公眾號(hào)，且每個(gè)微信ID僅可留言參與一次，不重復(fù)獲獎(jiǎng)；
2. 活動(dòng)結(jié)束后5個(gè)工作日內(nèi)，請(qǐng)中獎(jiǎng)用戶主動(dòng)聯(lián)系公眾號(hào)后臺(tái)，發(fā)送您的留言點(diǎn)贊截圖，并備注“領(lǐng)獎(jiǎng)+姓名+電話+收貨地址”，核對(duì)無誤后，我們將統(tǒng)一安排寄送；
3. 活動(dòng)結(jié)束后5個(gè)工作日內(nèi)未提交領(lǐng)獎(jiǎng)信息的用戶，視為自動(dòng)放棄資格；
4. 為保證活動(dòng)公平性，嚴(yán)禁任何形式的刷贊或重復(fù)留言行為，一經(jīng)核實(shí)將取消參賽資格；
5. 若最終出現(xiàn)點(diǎn)贊數(shù)相同的情況，排名將以用戶留言時(shí)間的先后順序?yàn)闇?zhǔn)，留言時(shí)間更早的排名靠前；
6. 本次活動(dòng)最終解釋權(quán)歸杭州柏恒科技有限公司所有。

用心做好每一臺(tái)儀器，誠(chéng)心服務(wù)每一位科研人。這個(gè)雙十一，讓柏恒科技的高品質(zhì)儀器與貼心好禮，伴您在科研征程上乘風(fēng)破浪，成果迭出！

下面小編就來分享一下自己當(dāng)初的一些經(jīng)驗(yàn)心得，僅代表個(gè)人看法。

先說體系配置（各組分分開，非預(yù)混液）。配置前先計(jì)算好所需要的各組分體積，統(tǒng)一配置好后再進(jìn)行分裝。有的同學(xué)可能會(huì)心疼試劑，獨(dú)愛單孔配置方式……但對(duì)于實(shí)驗(yàn)來說，一次即可順利獲取有效結(jié)果才是最大的節(jié)約。在體系的配置時(shí)需注意一下各組分的添加順序：先加ddH₂O,其余組分再按體積大小依次加入。排液時(shí)，吸頭扎入液面以下排液，排出液體后嚴(yán)禁原處反復(fù)吸打潤(rùn)洗槍頭（引物、酶、模板尤其需要注意）。吸頭有一定的吸附性，液體被排出后，如在原處潤(rùn)洗組分會(huì)被反吸回吸頭，經(jīng)過三五次的潤(rùn)洗可能會(huì)使目標(biāo)組分有嚴(yán)重的損失。如果想將吸頭內(nèi)的組分充分轉(zhuǎn)移，換個(gè)位置去潤(rùn)洗吸頭。體系混勻也需注意，可以用合適量程的移液器緩慢吹打5-10次，也可以緩慢上下顛倒混勻；如果需要用斡旋振蕩器混勻的話，轉(zhuǎn)速盡量控制在600rpm以下，轉(zhuǎn)速過快的話對(duì)酶的損傷較大，低拷貝模板的曲線是否起跳差異會(huì)比較明顯。體系分裝到pcr反應(yīng)管時(shí)，移液器保持“吸一打一”的操作，不易生成氣泡。

再說實(shí)驗(yàn)環(huán)境。老生常談的要在超凈工作臺(tái)內(nèi)配置反應(yīng)體系，生物安全柜內(nèi)添加模板。超凈臺(tái)內(nèi)，按照常規(guī)操作不會(huì)有太大問題；生物安全柜可是氣溶膠污染的重災(zāi)區(qū)。生物安全柜內(nèi)氣溶膠主要來源于加樣后的棄吸頭，生物安全柜內(nèi)以循環(huán)風(fēng)為主，棄吸頭內(nèi)的殘留模板很容易會(huì)隨循環(huán)風(fēng)彌漫整個(gè)安全柜的內(nèi)環(huán)境，所以每次實(shí)驗(yàn)完都需要及時(shí)把棄吸頭打包好取出安全柜。尤其遇到中午沒有完成整個(gè)實(shí)驗(yàn)下午還要繼續(xù)爆肝的情況，一定要把垃圾桶內(nèi)的棄槍頭清理干凈，如果沒有人使用的話就擦拭后進(jìn)行紫外照射。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的臺(tái)面清理及紫外消殺均屬基操，但需切實(shí)落實(shí)到位。

最后分享一下復(fù)孔實(shí)驗(yàn)如何操作可以提高曲線的成束性。配置反應(yīng)復(fù)孔時(shí)，可以參照統(tǒng)一配置體系的操作，將所有反應(yīng)孔的模板和體系混和好再逐孔分裝。這樣可以有效降低跳孔的風(fēng)險(xiǎn)。如果是低拷貝擴(kuò)增（Ct值33以后曲線起跳），就不推薦模板混入反應(yīng)體系再分裝了，此時(shí)還是老老實(shí)實(shí)的逐孔加入模板更為穩(wěn)妥（泊松分布影響明顯）。

此時(shí)是不是覺得自己強(qiáng)的可怕，迫不及待的想要實(shí)驗(yàn)一把？先別急，工欲善其事，必先利其器。柏恒科技專注PCR儀16年，可為您提供各類梯度PCR儀及qPCR儀，助力您的研究！

一.儀器外部清潔    

1.用潔凈毛巾或紙巾擦拭整機(jī)的外殼，將儀器挪開原先的位置，清理儀器下面的桌面的灰塵及細(xì)小的雜物，以免桌面上積攢過多導(dǎo)致污染頻出 。

2.檢查儀器進(jìn)風(fēng)口以及出風(fēng)口是有遮擋或灰塵積攢，以免通風(fēng)口被灰塵、纖維等雜物堵塞而造成散熱不好，從而影響儀器升降溫速度和溫控精準(zhǔn)度，造成實(shí)驗(yàn)效果不理想。    

3.儀器周圍需要留出20-30厘米空間以保證良好的通風(fēng)散熱，具體要求可參見儀器說明書。?

二.樣品槽清潔    

1.檢查PCR儀樣品槽是否潔凈如有污染，可用蘸有75%的棉簽擦拭樣品孔，再在25℃下運(yùn)行2-5min，以蒸干槽內(nèi)的酒精溶液。定期清潔樣品槽，建議半年1次。    

2.若是定量PCR儀，樣品孔中若被帶有熒光染料的樣品溶液污染，會(huì)影響實(shí)際樣品的檢測(cè)結(jié)果，所以更需要保證樣品槽的潔凈，建議2-3個(gè)月一次。 ? ?

三.熱蓋清潔    

1.檢查熱蓋是否左右晃動(dòng),熱蓋能夠卡緊扣好，以保證程序運(yùn)行過程中樣品沒有蒸發(fā)現(xiàn)象。    

2.PCR管蓋上的記號(hào)筆標(biāo)記容易在熱蓋上留下印漬，可定期用蘸有75%酒精的柔軟潔凈布進(jìn)行擦拭，并將熱蓋升溫至99℃保溫3-5min，以去除酒精殘留。    

四.測(cè)溫    

1.樣品槽溫度的均一性和準(zhǔn)確性關(guān)乎實(shí)驗(yàn)結(jié)果的好壞，建議聯(lián)系廠家或售后由專業(yè)的售后工程師定期對(duì)儀器進(jìn)行溫度測(cè)定及校準(zhǔn)，以保證儀器溫控性能正常（尤其是使用3年以上的儀器）。    

2.熒光定量pcr儀使用注意事項(xiàng) ? ?

避免腐蝕性液體接觸樣品槽，以免樣品槽表面被腐蝕，造成樣品加熱不均勻。    

3.避免PCR儀與冰箱等大功率儀器共用一個(gè)電源接口，大功率儀器的電流波動(dòng)會(huì)導(dǎo)致PCR儀的運(yùn)行不穩(wěn)定，甚至重啟。若是定量PCR儀，會(huì)影響收集到的熒光信號(hào)強(qiáng)度，造成擴(kuò)增曲線的波動(dòng)。    

4.儀器在運(yùn)行過程中，禁止強(qiáng)行切斷電源來結(jié)束程序（突遇停電等意外除外），因?yàn)殡娫辞袛嗪?，風(fēng)扇強(qiáng)制停止，導(dǎo)致儀器內(nèi)部元器件散熱不順暢，影響元器件使用壽命。    

5.如果發(fā)現(xiàn)儀器降溫速度明顯比正常狀態(tài)的慢，儀器發(fā)燙，或者溫度下降達(dá)不到設(shè)定的溫度，請(qǐng)檢查進(jìn)風(fēng)口和出風(fēng)口是否有異物堵塞。    

6.若采用PCR單管做實(shí)驗(yàn)而且樣品量比較少時(shí)，為保證熱蓋平整壓在所有樣品管上，建議在樣品槽四個(gè)角放置4個(gè)同類型的空管。    

7. PCR反應(yīng)最后低溫保存請(qǐng)?jiān)O(shè)置為：16℃， （切忌4℃長(zhǎng)時(shí)間保存，避免儀器過度耗損）。

*使用前預(yù)熱

儀器使用前需要進(jìn)行預(yù)熱，不僅對(duì)儀器維護(hù)有好處，還能節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間。儀器升溫快，但還是建議最好能在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前預(yù)熱2min，這樣可以有效延長(zhǎng)儀器的使用壽命。

*定期運(yùn)行維護(hù)

PCR儀器使用頻率較低的情況下，需要在儀器關(guān)閉1小時(shí)后用軟布或塑料紙覆蓋以防止灰塵進(jìn)入。儀器如果長(zhǎng)期不使用，需要至少每隔半個(gè)月進(jìn)行一次開機(jī)自檢，運(yùn)行20min左右。

這個(gè)九月
當(dāng)校園里飄起桂花香
當(dāng)實(shí)驗(yàn)室響起儀器輕鳴
我們?yōu)榭蒲腥藴?zhǔn)備了一份特別的開學(xué)禮——買一送六

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溫馨提示

1.本活動(dòng)僅面向終端客戶

2.贈(zèng)品隨主機(jī)一并發(fā)貨

3.每個(gè)訂單限享1套贈(zèng)品，贈(zèng)品數(shù)量50套送完即止

4.本活動(dòng)最終解釋權(quán)歸杭州柏恒科技有限公司所有

這個(gè)開學(xué)季
讓柏恒科技為您配備最硬核的科研裝備
送上最暖心的開學(xué)禮遇

引言

PCR是分子生物學(xué)研究的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)之一，常做實(shí)驗(yàn)的同學(xué)或許認(rèn)為非常簡(jiǎn)單，但對(duì)新人來說其實(shí)并不是那么友好。今天小編來分享下曾經(jīng)踩過的那些坑（血淚史）……

首先，優(yōu)質(zhì)的模板是成功反應(yīng)的前提。優(yōu)質(zhì)的模板需滿足以下幾點(diǎn)：高純度、足夠的長(zhǎng)度、適宜的濃度。核酸純度可以用超微量分光光度計(jì)檢測(cè)的兩個(gè)比值來衡量（260/280和260/230）。當(dāng)然超微量也可以檢測(cè)核酸的濃度，但不能有效反應(yīng)核酸的長(zhǎng)度。常見的動(dòng)物血液、組織、或者植物組織用超微量分光光度計(jì)檢測(cè)濃度沒有問題，但石蠟包埋樣本或者石蠟切片樣本檢測(cè)就需慎重，使用超微量分光光度計(jì)檢測(cè)純度的同時(shí)需要輔助其他手段驗(yàn)證其濃度是否準(zhǔn)確，比如跑膠看一下是否有明亮光影區(qū)（包埋樣本提取的核酸在所需長(zhǎng)度附近有明亮的片狀光影就OK了，基本沒有條帶一說）或者用染料法（Qubit）復(fù)測(cè)一下。最后再說一下適宜的濃度，擴(kuò)增試劑說明書中規(guī)定模板添加體積的同時(shí)大多也會(huì)說明投入核酸的總量，這時(shí)就需要根據(jù)核酸的濃度進(jìn)行簡(jiǎn)單的計(jì)算，不足的體積用水補(bǔ)足，投入反應(yīng)的核酸過多反而會(huì)導(dǎo)致非特異產(chǎn)物的增加。如果提取的核酸濃度過低，就只能適當(dāng)?shù)臄U(kuò)大添加體積，不過要適量，擴(kuò)大反應(yīng)體積的同時(shí)也意味著dNTPs、酶、引物等濃度的下降，進(jìn)而影響擴(kuò)增體系的性能。

柏恒科技超微量分光光度計(jì)在檢測(cè)核酸濃度、純度的基礎(chǔ)上還整合了染料法檢測(cè)功能，讓您的核酸質(zhì)控?zé)o憂

其次，搭配合理的反應(yīng)體系是成功反應(yīng)的保障。PCR反應(yīng)的五要素，除了模板其余四項(xiàng)都能歸入反應(yīng)體系的范疇。常規(guī)的PCR實(shí)驗(yàn)中，引物的濃度相對(duì)固定，所以只要找市場(chǎng)上口碑不差的合成公司來合成基本不會(huì)有什么問題。需要注意的是，引物如果溶了應(yīng)立即分裝凍存，最小分裝量根據(jù)每次實(shí)驗(yàn)所需體積自行確定。切忌引物溶解后不進(jìn)行分裝，整管凍存，反復(fù)凍融個(gè)三五次后效果就會(huì)下降不少。鎂離子、DNA聚合酶、dNTPs三者的相關(guān)性較高。dNTPs會(huì)結(jié)合鎂離子，被結(jié)合的鎂離子就無法再和DNA聚合酶結(jié)合，無法激活DNA聚合酶的活性。所以鎂離子的摩爾濃度一定要大于dNTPs的總濃度，但過高濃度的鎂離子在提高酶活和產(chǎn)物量的同時(shí)也提高了PCR反應(yīng)的錯(cuò)配率。所以如果PCR反應(yīng)結(jié)束后需要對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序研究就不推薦較高的鎂離子濃度。dNTPs也是類似，較高濃度有助于獲得更多的擴(kuò)增產(chǎn)物，但也會(huì)提高反應(yīng)的錯(cuò)配率。至于聚合酶，現(xiàn)在市場(chǎng)化的商品更青睞于混酶（高保真酶和Taq酶混合）既兼顧擴(kuò)增反應(yīng)的保真又保證了最終產(chǎn)物的得率。概括下來，PCR的反應(yīng)產(chǎn)物若是需要進(jìn)行測(cè)序研究就推薦相對(duì)低濃度鎂離子、dNTPs的反應(yīng)體系，讓堿基序列高度保真；若是僅看擴(kuò)增曲線或者產(chǎn)物條帶的話就推薦較高濃度的鎂離子、dNTPs的反應(yīng)體系，保證有更多/高的產(chǎn)物、信號(hào)。注：PCR反應(yīng)本身存在極低的錯(cuò)配率，對(duì)于分析產(chǎn)物的條帶大小或者qPCR的熒光信號(hào)分析不會(huì)有影響。但若進(jìn)行測(cè)序分析就需要考慮將錯(cuò)配率降至不影響測(cè)序結(jié)果的水平。

最后，相匹配的反應(yīng)程序是成功反應(yīng)的橋梁。模板在一次次的升降溫循環(huán)中完成自身的復(fù)制過程。常見的95℃變性、55℃退火、72℃延伸適用于大多數(shù)反應(yīng)，可以得到所需的目標(biāo)產(chǎn)物。但具體到某一實(shí)驗(yàn)時(shí)，還需根據(jù)引物的Tm值對(duì)反應(yīng)的溫度進(jìn)行微調(diào)，降低非特異擴(kuò)增、增加目標(biāo)產(chǎn)物，以期達(dá)到最佳的反應(yīng)效果。

柏恒科技PCR儀助力您快速確定匹配的反應(yīng)程序

2025“年中奮進(jìn)之旅”

—【蓄勢(shì)篇】—

七月的杭州熱情似火

柏恒人以更加熾熱的激情

開啟了2025年中奮進(jìn)之旅！

在這四天里

我們以數(shù)據(jù)丈量成長(zhǎng)

用戰(zhàn)略謀劃未來

憑實(shí)力加冕榮耀！

現(xiàn)在

讓我們一同回顧這段濃縮智慧的精彩時(shí)光！

市場(chǎng)戰(zhàn)略雙日談 Day 1-2

1  市場(chǎng)部年中復(fù)盤

市場(chǎng)部率先打響年中第一槍！通過深度復(fù)盤上半年市場(chǎng)表現(xiàn)，精準(zhǔn)把脈行業(yè)趨勢(shì)，制定了下半年戰(zhàn)略。

2  市場(chǎng)部與研發(fā)部的碰撞

在年中跨部門頭腦風(fēng)暴中，市場(chǎng)部與研發(fā)部的這場(chǎng)關(guān)于產(chǎn)品優(yōu)化及定位的辯論，意外成為最富啟發(fā)性的思想交鋒。

“當(dāng)市場(chǎng)敏銳度遇上技術(shù)創(chuàng)造力，火花就是這么耀眼！”

管理層戰(zhàn)略攻堅(jiān)/銷售精英培訓(xùn) Day 3

部門年中匯報(bào)

核心管理層8小時(shí)高強(qiáng)度閉門會(huì)議：

2025年中管理層會(huì)議系統(tǒng)總結(jié)了公司在技術(shù)創(chuàng)新、市場(chǎng)布局、運(yùn)營(yíng)優(yōu)化和人才建設(shè)等方面取得的突破性進(jìn)展，同時(shí)明確了下半年戰(zhàn)略目標(biāo)。

在思考的深度決定發(fā)展的高度。

銷售精英培訓(xùn)

為打造一支”懂技術(shù)、精業(yè)務(wù)、善服務(wù)”的銷售狼軍，開展了產(chǎn)品特訓(xùn)，來自全國(guó)各區(qū)域的銷售精英們?nèi)A麗蛻變！

最好的銷售是能用工程師思維講產(chǎn)品，用客戶語言說價(jià)值。

2025下半場(chǎng)，市場(chǎng)部已準(zhǔn)備好打一場(chǎng)漂亮的升級(jí)戰(zhàn)！

北高峰登頂行動(dòng)/年中盛典 Day4

【巔峰一日】

第四天的柏恒年中盛典

將”腳踏實(shí)地”與”年中盛典”完美融合！

從北高峰的晨曦到頒獎(jiǎng)臺(tái)的星光，

這一天注定載入柏恒史冊(cè)！

NO.1?晨光篇：北高峰登頂行動(dòng)

“勇攀高峰，再創(chuàng)巔峰”

銷售狼軍：
早晨7:00集結(jié)，登上天下第一財(cái)神廟
財(cái)神廟前許下”業(yè)績(jī)長(zhǎng)虹”的虔誠(chéng)心愿

“每登一級(jí)臺(tái)階，都是向年度目標(biāo)邁進(jìn)的一步！”

拜完財(cái)神，信心滿滿！  

柏恒銷售部，下半年繼續(xù)加油，  

讓業(yè)績(jī)和好運(yùn)一起‘噌噌’往上沖！

NO.2?午學(xué)篇：全員能力升級(jí)

在年中盛會(huì)之際，我們特別為全體員工打造了一場(chǎng)干貨滿滿的產(chǎn)品知識(shí)”充電站”！這場(chǎng)培訓(xùn)不僅是對(duì)公司產(chǎn)品線的系統(tǒng)梳理，更是對(duì)”以客戶為中心”理念的深度踐行。

質(zhì)量月活動(dòng)：

“質(zhì)量知識(shí)擂臺(tái)賽”上，來自各部門的代表展開了一場(chǎng)別開生面的智慧較量！這場(chǎng)競(jìng)賽不僅檢驗(yàn)了員工對(duì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的掌握程度，更生動(dòng)詮釋了”質(zhì)量就是企業(yè)生命線”的深刻內(nèi)涵。

這場(chǎng)別開生面的知識(shí)競(jìng)賽，用輕松有趣的方式達(dá)成了嚴(yán)肅的質(zhì)量教育目標(biāo)，為”柏質(zhì)·同心”質(zhì)量月活動(dòng)又新增了一亮點(diǎn)。現(xiàn)在，帶著這份對(duì)質(zhì)量的深刻認(rèn)知，全體柏恒人已整裝待發(fā)，向著”零缺陷”的目標(biāo)繼續(xù)前進(jìn)！

NO.3?戰(zhàn)略篇：領(lǐng)導(dǎo)力時(shí)刻

全體會(huì)議上：
黃總年中總結(jié)發(fā)言：從銷售突破到生產(chǎn)交付，從產(chǎn)品升級(jí)到流程優(yōu)化——我們用數(shù)據(jù)總結(jié)成長(zhǎng)，用問題指明方向。

但比成績(jī)更重要的，是共識(shí)的力量：唯有目標(biāo)同頻、思想同步，才能讓‘各自優(yōu)秀’凝聚成‘團(tuán)隊(duì)卓越’！

NO.4?榮耀篇：年中優(yōu)秀員工表彰

2025上半程的精彩，由每一位拼搏者共同書寫！

今天，我們?yōu)殚W耀的「星光」加冕——
是你們用專業(yè)鑄就標(biāo)桿，以創(chuàng)新突破邊界；
讓平凡的工作綻放不凡的光芒！

榜樣如炬，照亮前行之路；
下半程的戰(zhàn)鼓已擂響，讓我們繼續(xù)——
與榮耀同行，向巔峰進(jìn)發(fā)！

【預(yù)告篇】
精彩仍在繼續(xù)！明后兩天，我們將：
安吉團(tuán)建之旅：趣味運(yùn)動(dòng)會(huì)+燒烤晚會(huì)
星空夜話：暢想柏恒美好未來

團(tuán)隊(duì)拓展挑戰(zhàn)：勇闖浙北大峽谷

四天的沉淀，一年的能量！

所有蓄力，都是為了更好的迸發(fā)！

2025下半程，柏恒人已整裝待發(fā)！

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[?PCR出現(xiàn)雜帶的處理辦法]

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PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）和凝膠電泳是分子生物學(xué)研究中常用的技術(shù)，它們通常結(jié)合使用以鑒定和分析PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。然而，在進(jìn)行PCR凝膠電泳時(shí)，經(jīng)常會(huì)在電泳圖譜中發(fā)現(xiàn)雜帶，這些雜帶可能會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，甚至導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。

本文將探討PCR凝膠電泳過程中雜帶的成因，并提供一些可能的解決方案。

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PCR條件優(yōu)化： 調(diào)整PCR反應(yīng)條件，退火溫度過低會(huì)導(dǎo)致引物與模板的非特異性結(jié)合，從而引發(fā)非特異性擴(kuò)增；退火溫度過高則可能抑制引物與模板的正常結(jié)合，影響擴(kuò)增效率。可以通過梯度PCR實(shí)驗(yàn)逐步確定最佳的退火溫度 一般而言，PCR反應(yīng)的退火步驟的溫度通常在50°C到68°C之間，具體取決于引物的堿基序列和目標(biāo)DNA的特性。有些引物需要更高的退火溫度來確保特定區(qū)域的特異性結(jié)合，但一般情況下，最高退火溫度不會(huì)超過68°C。

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引物設(shè)計(jì)不合理：如果引物長(zhǎng)度過短、序列重復(fù)或含有高GC區(qū)域，可能導(dǎo)致引物與模板的非特異性結(jié)合，進(jìn)而產(chǎn)生雜帶。需要重新設(shè)計(jì)引物，確保引物的長(zhǎng)度適當(dāng)、序列不重復(fù)、GC含量適中，并避免在引物內(nèi)部或引物與模板的結(jié)合區(qū)域出現(xiàn)高GC區(qū)域。

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引物用量不當(dāng)：引物用量過大或特異性不高，可能會(huì)導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增，從而產(chǎn)生雜帶。建議調(diào)換引物或降低引物的使用量。

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模板不純：模板DNA中含有雜質(zhì)，如蛋白質(zhì)、RNA或其他非目標(biāo)DNA片段，可能作為PCR擴(kuò)增的模板，導(dǎo)致額外條帶的出現(xiàn)。

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模板降解：模板DNA在提取或儲(chǔ)存過程中發(fā)生降解，產(chǎn)生的小片段DNA可能成為非特異性擴(kuò)增的模板。

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純化模板DNA：PCR實(shí)驗(yàn)中的模板DNA可以來自多種來源，包括基因組DNA（gDNA）、互補(bǔ)DNA（cDNA）以及質(zhì)粒DNA等。然而，不同來源的DNA在組成和復(fù)雜度上可能有所不同，這會(huì)影響PCR擴(kuò)增的最佳起始量。例如，在50 μL的PCR反應(yīng)中，質(zhì)粒DNA僅需0.1–1 ng，而gDNA則需要5–50 ng。此外，所使用的DNA聚合酶類型也會(huì)對(duì)最佳模板起始量產(chǎn)生影響。經(jīng)過改造的DNA聚合酶對(duì)模板的親和力更強(qiáng)，靈敏度更高，因此所需的DNA起始量相對(duì)較少。優(yōu)化DNA起始量至關(guān)重要，因?yàn)槠鹗剂窟^高可能導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增的風(fēng)險(xiǎn)增加，而起始量過低則可能降低PCR的得率。有時(shí)，PCR實(shí)驗(yàn)方案會(huì)使用拷貝數(shù)來表示DNA起始量，特別是對(duì)于gDNA?？截悢?shù)的計(jì)算涉及Avogadro常數(shù)和摩爾質(zhì)量，具體公式為：拷貝數(shù) = L × 摩爾數(shù) = L ×（總質(zhì)量/摩爾質(zhì)量）。

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Mg2?濃度過高：Mg2?是PCR反應(yīng)中的重要成分，但其濃度過高會(huì)降低PCR擴(kuò)增的特異性，增加非特異性擴(kuò)增的風(fēng)險(xiǎn)。需要通過實(shí)驗(yàn)確定最佳的Mg2?濃度。

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酶的用量或質(zhì)量不佳：酶的用量過高或酶的質(zhì)量不好，都會(huì)影響PCR反應(yīng)。建議降低酶量或更換另一來源的酶。

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使用熱啟動(dòng)PCR： 熱啟動(dòng)PCR可以減少反應(yīng)在低溫度時(shí)可能引起的非特異性擴(kuò)增。

熱啟動(dòng)PCR是一種用于減少非特異性擴(kuò)增的技術(shù)。在常規(guī)PCR中，當(dāng)反應(yīng)溫度升高到擴(kuò)增溫度之前，引物可能已經(jīng)結(jié)合到模板DNA上。這可能導(dǎo)致在PCR開始階段就發(fā)生非特異性擴(kuò)增，產(chǎn)生雜帶或假陽性結(jié)果。熱啟動(dòng)PCR通過在PCR反應(yīng)中添加熱穩(wěn)定的DNA聚合酶來解決這個(gè)問題。

熱啟動(dòng)PCR的關(guān)鍵是使用一種需要高溫激活的聚合酶。這樣的酶在較高溫度下才會(huì)變活躍，因此在反應(yīng)開始時(shí)才會(huì)開始擴(kuò)增目標(biāo)DNA序列，而不會(huì)在低溫時(shí)引發(fā)非特異性反應(yīng)。

一些常用的熱啟動(dòng)聚合酶包括熱穩(wěn)定的Taq聚合酶的改良版本，例如具有熱活化域的Taq DNA聚合酶，以及Pfu或Phusion等高保真度聚合酶。

所以現(xiàn)在的酶基本上都滿足條件。

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檢查實(shí)驗(yàn)室環(huán)境： 避免DNA污染及實(shí)驗(yàn)儀器的污染，使用無菌技術(shù)和經(jīng)過處理的試劑，保持實(shí)驗(yàn)室清潔。

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梯度優(yōu)化PCR：使用溫度梯度進(jìn)行PCR反應(yīng)，尋找最適合特異性擴(kuò)增的溫度。

柏恒科技智能二維梯度PCR儀可在在同一反應(yīng)中同時(shí)優(yōu)化變性及退火的溫度梯度變性可設(shè)橫向8行變性梯度縱向可設(shè)12列退火溫度，從而來優(yōu)化最佳的退火溫度，從而提高PCR反應(yīng)的特異性和效率。

這個(gè)技術(shù)對(duì)于優(yōu)化引物、模板和PCR條件非常有用，以確保獲得高質(zhì)量和特異性的PCR產(chǎn)物。

這些方法可以單獨(dú)或結(jié)合使用，幫助減少或消除PCR雜帶問題。

在聊壓縮時(shí)長(zhǎng)之前，需先對(duì)試管（Tube）/模塊(Block)控溫；普通/快速模式幾個(gè)概念進(jìn)行簡(jiǎn)介。下面以柏恒Q9606為圖例進(jìn)行說明。

圖1

模塊控溫：反應(yīng)升降溫時(shí)，以模塊的實(shí)時(shí)溫度為準(zhǔn)。

試管控溫：反應(yīng)升降溫時(shí)，以反應(yīng)管內(nèi)試劑的實(shí)時(shí)溫度為準(zhǔn)。

圖2

圖3

實(shí)驗(yàn)編輯完成后，點(diǎn)擊運(yùn)行按鈕會(huì)彈出提示框（如圖2），選擇快速模式還是普通模式。

以圖3程序?yàn)槔f明：

快速模式：儀器運(yùn)行的升降溫速率為8℃/s，標(biāo)示升降溫速率的全額運(yùn)行實(shí)驗(yàn)。

普通模式：儀器運(yùn)行的升降溫速率為4℃/s，標(biāo)示升降溫速率的半額運(yùn)行實(shí)驗(yàn)。

不同的應(yīng)用場(chǎng)景選擇不同的反應(yīng)模式組合，下面來分享一下如何調(diào)試快速試劑的反應(yīng)程序。

首先，儀器運(yùn)行設(shè)置選擇快速模式+模塊控溫的組合將反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)進(jìn)行極致壓縮。其次，在總時(shí)長(zhǎng)不變的前提下合理分配循環(huán)段變性與退火延伸的時(shí)長(zhǎng)。最后，在其次篩選出可用反應(yīng)程序的基礎(chǔ)上進(jìn)行微調(diào)，再一次縮短反應(yīng)段的時(shí)長(zhǎng)或在總時(shí)長(zhǎng)允許的條件下適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)段的時(shí)長(zhǎng)以達(dá)到最優(yōu)的反應(yīng)效果。

因?yàn)榭焖僭噭┧玫臄U(kuò)增酶相較于普通試劑的酶來說有著更為快速的延伸速度，所以在設(shè)置退火延伸段反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)時(shí)可以進(jìn)行大幅度的壓縮。在壓縮變性反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)時(shí)須注意，因?yàn)檫x用的是模塊控溫，如果變性時(shí)長(zhǎng)過短會(huì)造成試劑的實(shí)際溫度不足95℃或95℃維持時(shí)長(zhǎng)不夠而造成模板的解雙鏈不充分進(jìn)而影響信號(hào)的積累，所以變性反應(yīng)段的時(shí)長(zhǎng)不宜過度極端。

柏恒Q9600系列可提供最快8℃/sec的升降溫速率，且具備等溫差梯度功能（如圖4），滿足常規(guī)試劑開發(fā)、檢測(cè)的同時(shí)也為快速試劑提供了一個(gè)很好的反應(yīng)平臺(tái)。

圖4

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（本文最終解釋權(quán)歸杭州柏恒科技有限公司所有）

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